ПЦР-диагностика в режиме реального времени

Суть метода:  позволяет найти в исследуемом клиническом материале небольшой участок генетической информации инфекционного возбудителя и многократно размножить его.

Принцип метода: заключается в удвоении (амплификации) участка ДНК, уникального для того или иного вида возбудителя, при помощи фермента ДНК-полимеразы. За каждый следующий цикл амплификации происходит удвоение как исходного участка ДНК, так и вновь образовавшихся фрагментов (амплификатов). В результате,  при наличии даже минимального исходного количества возбудителя, происходит накопление продукта реакции, превышающее исходное количество фрагментов генома в миллионы и миллиарды раз, что делает возможным его обнаружение различными методами.

Достоинства метода полимеразной цепной реакции:

• Высокая специфичность: в исследуемом материале выявляется уникальный, характерный только для данного возбудителя фрагмент ДНК.

• Высокая чувствительность: полимеразная цепная реакция способна выявлять единичные копии ДНК. В среднем порог чувствительности большинства современных тест-систем составляет от 10 до 100 копий ДНК. Это значительно превышает чувствительность культуральных методов исследования.

• Отсутствие жестких требований к качеству исследуемого материала, как в случае цитологических и микроскопических методов.

• Возможность диагностики не только острых, но и латентных инфекций:  особенно эффективен метод ПЦР для диагностики трудно культивируемых, некультивируемых и персистирующих форм микроорганизмов, с которыми часто приходится сталкиваться при латентных и хронических инфекциях.